SILAC (Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture) 的基本原理是通过培养,利用**同位素(轻型)或者稳定同位素(中型/重型)取代相应氨基酸。经过5-6次传代后,稳定同位素可以完全掺入到新合成的蛋白质中。不同标记的细胞或者蛋白等比例混合后,引入质谱鉴定。如果峰值呈现为1:1,则表示此蛋白的含量无差异。如果含有重型氨基酸的峰值偏高,说明重型氨基酸标记的组中此蛋白含量更高。SILAC的优点是蛋白标记效率高,传代6-8代后,灵敏性高。可检测水平低的蛋白含量变化和翻译后修饰,且样本需求量小,每个样本仅需几十微克,缺点是耗时长。